無(wú)菌檢查的定義以及局限性

2015-02-16 16:21:15 admin

無(wú)菌檢查的定義以及局限性

GMP微生物滅菌的專業(yè)知識(shí) 無(wú)菌”從定義上來說是一個(gè)絕對(duì)的概念，但遺憾的是，在科學(xué)和技術(shù)高度發(fā)展的今天，藥品的絕對(duì)無(wú)菌是做不到的，也無(wú)法加以證實(shí)。然而，無(wú)菌制劑的安全性要求人們?cè)O(shè)定無(wú)菌的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)。FDA、歐洲制藥工業(yè)界曾將百萬(wàn)分之一微生物污染率作為滅菌產(chǎn)品“無(wú)菌”的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)，它和蒸汽滅菌后產(chǎn)品中微生物存活的概率為10-6（即產(chǎn)品的無(wú)菌保證值為6），系同一標(biāo)準(zhǔn)的不同表示法。這一標(biāo)準(zhǔn)于1980起收錄于USP 中，如今已為世界各國(guó)普遍接受和采用。

     無(wú)菌檢查基本定義：檢查要求無(wú)菌的藥品、醫(yī)療器具、原料、輔料、以及要求無(wú)菌的其他物品是否染有活菌的一種方法。
    符合無(wú)菌檢查法的規(guī)定僅表明了供試品在該檢驗(yàn)條件下未發(fā)現(xiàn)細(xì)菌和真菌污染。
    無(wú)菌檢查法是建立在批產(chǎn)品受微生物污染是均勻的假設(shè)上。即使該批產(chǎn)品的污染非常均勻，檢出低污染的概率也是極低的。因此，無(wú)菌檢查存在風(fēng)險(xiǎn)和局限性。應(yīng)盡量抽取批產(chǎn)品生產(chǎn)開始、結(jié)束或生產(chǎn)過程出現(xiàn)異常情況下的產(chǎn)品進(jìn)行檢查。

    藥品生產(chǎn)中的污染來源
    人員
    在100級(jí)潔凈區(qū)或萬(wàn)級(jí)背景下的局部100級(jí)潔凈區(qū)。人是無(wú)菌藥品生產(chǎn)中的主要污染源，即使在管理比較到位，生產(chǎn)設(shè)備自動(dòng)化程度較好，操作人員素質(zhì)較高的企業(yè)，人員操作所致的污染率也超過70%。
    水源性微生物
    絕大多數(shù)為革蘭氏陰性菌，不會(huì)形成芽孢，不耐熱。其代謝產(chǎn)物及細(xì)胞的尸體及碎片均屬細(xì)胞內(nèi)毒素的污染源空氣中的微生物基本為革蘭氏陽(yáng)性菌，有可能會(huì)形成芽孢使其耐熱性增大。

   無(wú)菌檢查的局限性
   無(wú)菌的定義
    理論上：無(wú)菌＝?jīng)]有任何活的微生物；實(shí)際上：我們無(wú)法證明產(chǎn)品中沒有活微生物存在。
    無(wú)法對(duì)整批產(chǎn)品進(jìn)行100%檢驗(yàn)無(wú)菌檢驗(yàn)的結(jié)果只是一個(gè)基于“可能性”的判斷。無(wú)菌檢驗(yàn)用培養(yǎng)基有其局限性對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定是基于“是否在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)”；培養(yǎng)條件（如溫度和時(shí)間）是有限的；我們的工作環(huán)境及操作是在相對(duì)無(wú)菌的狀態(tài)。

    無(wú)菌保證工藝：
    無(wú)菌保證工藝即：使產(chǎn)品達(dá)到規(guī)定的無(wú)菌保證水平的工藝過程。無(wú)菌保證工藝可分為兩大類：最終滅菌工藝（terminal sterilization process）和非最終菌生產(chǎn)工藝（aseptic processing）。
    最終滅菌工藝系指將完成最終密封的產(chǎn)品進(jìn)行滅菌，以殺滅產(chǎn)品中的微生物的工藝。由此生產(chǎn)的無(wú)菌制劑稱為最終滅菌無(wú)菌藥品。我國(guó)和國(guó)際主要藥典規(guī)定通過最終滅菌使這類藥品中污染的微生物殘存概率下降致不高于10-6的水平，以SAL≤10-6表示。應(yīng)通過滅菌工藝驗(yàn)證確認(rèn)已滅菌產(chǎn)品的無(wú)菌保證水平。

    非最終滅菌工藝非最終滅菌工藝系指在無(wú)菌環(huán)境條件下通過無(wú)菌操作生產(chǎn)無(wú)菌產(chǎn)品的方法。具體就是將組成藥品的原料和包裝材料分別滅菌或經(jīng)除菌處理，在無(wú)菌條件下將其組裝成成品的工藝。經(jīng)該工藝生產(chǎn)的無(wú)菌制劑稱為非最終滅菌的無(wú)菌藥品。世界衛(wèi)生組織、歐盟以及美國(guó)FDA等對(duì)非最終滅菌的無(wú)菌藥品的無(wú)菌保證水平分別作出了規(guī)定。目前WHO、歐盟和我國(guó)送審稿GMP執(zhí)行的標(biāo)準(zhǔn)是95%可信限下微生物殘存概率不超過0.1%，大致相當(dāng)于3000瓶產(chǎn)品中不得有1瓶染菌的水平。美國(guó)FDA的標(biāo)準(zhǔn)要求更為嚴(yán)格，通俗的表達(dá)為5000瓶產(chǎn)品中不得有１瓶染菌。必須通過培養(yǎng)基灌裝模擬試驗(yàn)來驗(yàn)證生產(chǎn)工藝能達(dá)到上述標(biāo)準(zhǔn)。